实验术语与待补关键词

使用方法

后续在会议、邮件、实验报告或项目讨论中遇到不熟悉的词，直接追加到“待补充”表格。本知识库随后按以下结构补齐：

一句话定义
→ 在研发流程中的位置
→ 实验输入与输出
→ 关键质量指标
→ 常见误解/失败模式
→ 与CADD/AIDD的连接

已加入关键词

1. 质粒（plasmid）

质粒是可在宿主细胞中复制或表达外源基因的 DNA 载体。对重组抗体而言，常见关注点包括：

• 重链和轻链是两个质粒还是同一双顺反子/多表达盒载体；
• promoter、signal peptide、poly(A)、selection marker、origin of replication；
• VH/VL、恒定区、Fc mutation 和标签是否正确；
• 密码子优化、序列验证、质粒浓度、纯度和内毒素；
• transfection-grade 与普通克隆级质粒的区别。

研发链条：

amino-acid sequence
→ codon optimization
→ gene synthesis
→ cloning into expression plasmid
→ sequence verification
→ transfection into HEK/CHO
→ antibody expression

2. CRS（cytokine release syndrome）

CRS 是免疫细胞被强烈激活后产生的全身性炎症综合征，可见于 TCE、CAR-T 等治疗。它不等于“检测到某个 cytokine 升高”，也不等同于体外 cytokine release assay。

需要区分：

• 体外 cytokine release assay：风险识别模型；
• 动物 cytokine profile：物种和模型相关的体内信号；
• 临床 CRS：综合症状、生命体征、器官影响和实验室指标后的临床判断与分级。

对 TCE 项目需联动理解 target density、CD3 arm、价态、Fc、剂量、给药速度、step-up dosing、肿瘤负荷和个体免疫差异。

3. 杂交瘤（hybridoma）

杂交瘤技术把免疫动物的抗体产生 B 细胞与可持续增殖的骨髓瘤细胞融合，经过选择、筛选和单克隆化，获得稳定分泌某一抗体的细胞株。

典型链条：

antigen preparation
→ animal immunization
→ B-cell isolation
→ fusion
→ HAT selection
→ supernatant screening
→ subcloning/monoclonality
→ sequencing
→ recombinant expression and validation

优势：成熟、可直接获得抗体分泌克隆。局限：通常周期较长，受免疫耐受和动物免疫反应影响；得到候选后仍需测序和重组确认。

4. 噬菌体展示库（phage display library）

把 scFv、Fab 或 VHH 等抗体片段展示在噬菌体表面，同时噬菌体内部携带其编码 DNA，从而建立 genotype–phenotype linkage。

关键概念：

• naïve、immune、synthetic/semi-synthetic library；
• library size、insert rate、sequence diversity 和 developability bias；
• solid-phase、solution、cell-based 或 negative selection；
• panning、enrichment、clone screening 和 sequencing；
• 展示片段命中不等于转成全长 IgG 后仍保持相同性质。

5. 单细胞测序与单 B 细胞抗体发现

“单细胞测序”是大类技术，包括 scRNA-seq、单细胞 V(D)J/BCR/TCR 测序等。抗体发现重点通常是：

• 获得单个 B 细胞天然配对的 VH/VL；
• 结合 antigen-specific sorting、memory B/plasma B 表型；
• clonotype、somatic hypermutation、isotype 和 lineage；
• 序列合成、重组表达和功能验证。

单细胞序列本身不能证明抗体有活性；最终仍需要表达、纯化、结合和功能实验。

三种抗体发现路线对比

待补充关键词